更新時(shí)間:2012-09-07
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一、化凍
將血清(FetalBovineSerum,Hyclone)從-20℃冰箱取出,放于4℃冰箱化凍過(guò)夜;也可室溫(或浸于自來(lái)水中)化凍,化凍后若不馬上滅活,可以放入4℃冰箱暫時(shí)保存;
二、滅活
1、放入室溫的水浴鍋內(nèi)開(kāi)始加熱(同時(shí)放入一個(gè)內(nèi)裝200ml自來(lái)水的血清瓶,插入一根溫度計(jì),溫度監(jiān)控以此為準(zhǔn));
2、當(dāng)溫度計(jì)顯示56℃時(shí),控制在此溫度30分鐘±3分鐘;若不小心使溫度上升超過(guò)56℃,則:若仍未超過(guò)60℃,且時(shí)間很短(比如:不超過(guò)5分鐘),則仍可使用;若超過(guò)60℃,或者時(shí)間較長(zhǎng),則棄去不用,或者嘗試用于ME細(xì)胞的培養(yǎng);
3、取出,自然冷卻至室溫(約需1-3小時(shí)),可分裝或-20℃繼續(xù)凍存。
三、分裝
1、轉(zhuǎn)入細(xì)胞間,用移液器將血清分裝,注意預(yù)先要將血清輕輕搖動(dòng)數(shù)周、混勻;吹出血清時(shí)要注意:不要吹出氣泡(血清很粘稠,很容易產(chǎn)生氣泡;如果已產(chǎn)生氣泡,則在酒精燈火焰上過(guò)一下);標(biāo)好批號(hào)和日期;
2、放入-20℃冰箱凍存(分裝一次大約可以使用1—2個(gè)月)。
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